2023 - Naiara de Cássia Gancedo
Ph.D. Dissertation
Autor/author: Naiara de Cássia Gancedo
Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas - Universidade Estadual de Maringá
Área do Conhecimento: Farmacognosia
Data de Defesa: 02 de fevereiro de 2023
Orientador: Prof. Dr. João Carlos Palazzo de Mello
Banca examinadora: Prof. Dr. João Carlos Palazzo de Mello
Profa. Dra. Danielle Lazarin Bidóia
Dra. Mariana Millan Fachi
Prof. Dr. Noberto Peporine Lopes
Prof. Dra. Tania Maria Bellé Bresolin
Título: Avaliação do potencial biológico de espécies de Limonium Mill. e da atividade antiproliferativa de substâncias isoladas do rizoma de Limonium brasiliense em linhagens de câncer de próstata.
Resumo: Limonium Mill., Plumbaginaceae, é considerado um gênero cosmopolita e nativo de regiões de clima temperado e subtropical. No Brasil, este gênero é representado pela espécie L. brasiliense, conhecida como “baycuru, guaycuru ou guaycurá”, e utilizada na medicina popular para o tratamento de diversas patologias. Este estudo objetivou sintetizar os aspectos gerais e específicos relacionados ao potencial anticancerígeno de espécies de Limonium Mill. por meio de um estudo de revisão sistemática (capítulo 1), além de realizar a análise fitoquímica e do potencial antiproliferativo de substâncias isoladas dos rizomas de L. brasiliense (capítulo 2). Para isso, uma busca sistemática foi realizada nas bases de dados eletrônicas PubMed/MEDLINE, Scopus e Scielo, e manualmente. Os estudos que avaliaram a atividade anticancerígena in vitro, in vivo, ex vivo ou in silico de extratos brutos, frações, subfrações ou substâncias isoladas de espécies de Limonium foram incluídos. Para o estudo fitoquímico do rizoma de L. brasiliense diferentes técnicas cromatográficas e de espectroscopia foram utilizadas, incluindo cromatografia em coluna, cromatografia em camada delgada, cromatografia líquida de alta eficiência, cromatografia líquida de ultra eficiência, espectroscopia de ressonância magnética nuclear, polarimetria, dicroísmo circular e espectrometria de massas. A atividade antiproliferativa das substâncias isoladas foi avaliada em linhagens celulares de câncer de próstata (PC-3 e LNCaP) e normal (RWPE-1), pelo método de MTT. No estudo de revisão sistemática, um total de 942 estudos foram identificados e 33 foram incluídos para leitura na íntegra, sendo 17 estudos considerados elegíveis para a síntese qualitativa dos dados. Destes, 14 (82,35%) referem-se a ensaios in vitro, um (5,88%) a in vivo e dois (11,76%) foram designados como ensaios in vitro e in vivo. Diferentes substâncias e seus impactos na viabilidade celular de uma série de linhagens cancerígenas foram avaliadas. No capítulo 2 foi possível confirmar que os resultados obtidos a partir dos rizomas de L. brasiliense estavam dentro dos limites definidos em estudos prévios para a espécie, comprovando a qualidade da matéria-prima. A cromatografia em coluna da fração acetato de etila permitiu o isolamento e identificação da substância epigalocatequina-3-O-galato (EGCG) com grau de pureza satisfatório. Os resultados dos estudos in vitro reforçam o potencial de L. brasiliense como fonte de substâncias com atividade antiproliferativa contra linhagens celulares de câncer de próstata, incluindo a samarangenina B e EGCG, além de servir de base para futuros estudos relacionados ao possível mecanismo de ação destas substâncias..
Palavras-chave: Citotoxicidade, Fitoquímica, Revisão Sistemática, Plumbaginaceae.
Title: Biological potential evaluation of species of Limonium Mill. and the anti-proliferative activity of compounds isolated from the rhizome of Limonium brasiliense in prostate cancer cell lines.
Abstract: Limonium Mill., Plumbaginaceae, is a cosmopolitan genus native to temperate and subtropical regions. In Brazil, this genus is represented by L. brasiliense species, known as “baycuru, guaycuru or guaycurá”, and used in folk medicine for the treatment of various pathologies. This study aimed to synthesize the general and specific aspects related to the anticancer potential of Limonium Mill. species through a systematic review study (chapter 1), in addition to performing a phytochemical analysis and the anti-proliferative potential of compounds isolated from L. brasiliense rhizomes in prostate cancer cell lines (chapter 2). Thus, a systematic search was performed in the electronic databases PubMed/MEDLINE, Scopus and Scielo, and manually. Studies that evaluated in vitro, in vivo, ex vivo or in silico anticancer activity of crude extracts, fractions, subfractions or compounds isolated from Limonium species were included. For the phytochemical study of L. brasiliense rhizome, different chromatographic and spectroscopy techniques were used, including column chromatography, thin layer chromatography, high-performance liquid chromatography, ultra-performance liquid chromatography, nuclear magnetic resonance spectroscopy, polarimetry, circular dichroism, and mass spectrometry. The anti-proliferative activity of the isolated compounds was evaluated in normal (RWPE-1) and prostate cancer (PC-3 and LNCaP) cell lines, using the MTT method. In the systematic review study, a total of 942 studies were identified, and 33 were included for full reading, with 17 studies considered eligible for qualitative data synthesis. Of these, 14 (82.35%) refer to in vitro assays, one (5.88%) to in vivo assays, and two (11.76%) were designated as in vitro and in vivo assays. Different compounds and their impacts on the cell viability of a range of cancer cell lines were evaluated. In chapter 2 was possible to confirm that the results obtained from L. brasiliense rhizomes were within the limits defined in previous studies for the species, proving the quality of the plant material. Column chromatography of the ethyl acetate fraction allowed the isolation and identification of the compound epigallocatechin-3-O-gallate (EGCG) with a satisfactory degree of purity. The results of in vitro studies reinforce the potential of L. brasiliense as a source of compounds with anti-proliferative activity against prostate cancer cell lines, including samaragenin B and EGCG, in addition to serving as a basis for future studies related to the possible mechanism of action of these compounds.
Keywords: Cytotoxicity, Phytochemistry, Systematic Review, Plumbaginaceae.
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