2019 - Naiara Cássia Gancedo
MSc. Thesis
Autor/author: Naiara Cássia Gancedo
Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas - Universidade Estadual de Maringá
Data de Defesa: 25 de janeiro de 2019
Orientador: Prof. Dr. João Carlos Palazzo de Mello
Banca examinadora: Prof. Dra. Danielle Lazarin Bidóia
Prof. Dr. Admilton Gonçalves de Oliveira Júnior
Título: Avaliação etnofarmacológica da casca caulinar de Croton floribundus.
Resumo: Croton floribundus Spreng., Euphorbiaceae, conhecida popularmente na região Sul do Brasil como “capixingui” é uma árvore nativa encontrada no domínio fitogeográfico da Mata Atlântica. Na medicina popular é relatada a atividade do chá da casca caulinar de C. floribundus para o tratamento de leucemia, tumores e sífilis, além de relatos do uso popular das cascas para o tratamento de câncer de próstata. As plantas do gênero Croton são ricas em metabólitos secundários da classe dos diterpenos, alcaloides, taninos e flavonoides. O objetivo deste trabalho foi estabelecer parâmetros para o controle de qualidade da casca caulinar de C. floribundus, determinar o melhor solvente extrator, avaliar in vitro a capacidade antiproliferativa dos extratos brutos e o perfil químico do extrato com melhor índice de seletividade. Diferentes ensaios foram realizados, incluindo a análise organoléptica, tendo a amostra apresentado odor de mentol, cânfora e sabor amargo. As principais características macroscópicas foram a presença de periderme delgada e de estriações. As principais características microscópicas distintivas da espécie são: fibras gelatinosas calibrosas, idioblastos com conteúdo característico, esclereides, numerosos idioblastos com drusa presentes por todo o córtex, mas especialmente sendo abundantes nos raios parenquimáticos do floema, e ausência de laticíferos nas amostras de cascas com mais de 4 mm de espessura. A análise granulométrica indicou fragmentos com tamanho médio de 0,3 mm. Os ensaios qualitativos indicaram resultado positivo para os metabólitos secundários: taninos condensados, lactonas sesquiterpênicas e glicosídeos saponínicos, com índice afrosimétrico de 200. Os ensaios quantitativos indicaram teor de polifenóis totais de 6,33%±0,02 (CV%0,39). A pureza da amostra foi determinada pelo teor de cinzas totais (3,97%±0,19, CV%4,78), teor de umidade (10,32%±0,27, CV%2,69) e ausência de matéria estranha. O teor de extrativos foi de 9,61%±0,01(CV%0,16). A análise dos extratos brutos preparados com solventes de diferentes polaridades frente ao radical DPPH revelou ser a acetona 70% o melhor líquido extrator, apresentando melhor capacidade antioxidante (CE50 = 24,51±0,11 μg/mL, CV%0,41) e maior teor de resíduo seco (0,30 g RS/g DV). O extrato acetona 70% foi o extrato bruto com melhor capacidade antiproliferativa (CI50 = 42,11±6,32 μg/mL e IS 3,20 (PC-3); CI50 = 21,5±2,99 μg/mL e IS 6,27 (LNCaP)). A análise de cromatografia líquida acoplada com espectrometria de massas, sugeriu a presença majoritária de diterpenos e sesquiterpenos, no extrato bruto acetona 70%. Com os resultados das análises, foi possível contribuir com futuros estudos fitoquímicos, farmacognósticos e do potencial biológico de C. floribundus.
Palavras-chave: Câncer de Próstata; Controle de Qualidade; Euphorbiaceae; Fitoquímica; Farmacognosia..
Title: Ethnopharmacological evaluation of Croton floribundus bark.
Abstract: Croton floribundus Spreng., Euphorbiaceae, popularly known in South region of Brazil as "capixingui" is a native tree found in the phytogeographic domain of the Atlantic Rainforest. It is reported in folk medicine the tea activity of C. floribundus bark for the treatment of leukemia, tumors and syphilis as well as reports of the folk use of the bark for the treatment of prostate cancer. Plants of the genus Croton are rich in secondary metabolites of the class of diterpenes, alkaloids, tannins, and flavonoids. The aim of this work was to establish parameters for the quality control of C. floribundus bark, to determine the best extraction solvent, in vitro evaluation of the antiproliferative capacity of the crude extracts and the chemical profiling of the extract with the best selectivity index. Different assays were performed, including organoleptic analysis, with the sample showing menthol, camphor and bitter taste. The main macroscopic features were the presence of thin peridermis and striations. The main distinctive microscopic features of the species are: calibrous gelatinous fibers, idioblasts with characteristic content, sclereids, numerous idioblasts with druse present throughout the cortex, but specially being abundant in the parenchyma rays of the phloem and absence of laticifers in the samples of bark with more than 4 mm of thickness. The granulometric analysis indicated fragments with a mean size of 0.3 mm. Qualitative assays indicated a positive result for the secondary metabolites: condensed tannins, sesquiterpene lactones and saponin glycosides, with an afrosimetric index of 200. Quantitative assays indicated a total polyphenol content of 6.33%±0.02, RSD%0.39. The purity of the sample was determined by total ash content (3.97%±0.19, RSD%4.78), water content (10.32%±0.27, RSD%2.69) and absence of foreign matter. The water-soluble extractives content was 9.61%±0.01, RSD%0.16. Analysis of the crude extracts prepared with solvents of different polarities against the DPPH radical revealed that 70% acetone was the best extractive liquid, presenting better antioxidant capacity (EC50=24.51±0.11 μg/mL, RSD%0.41) and higher content of dry residue (0.30 g DR/g HD). The 70% acetone extract was the crude extract with the best antiproliferative capacity (IC50=42.11±6.32 μg/mL and SI 3.20 (PC-3); IC50=21.5±2.99 μg/mL and SI 6.27 (LNCaP)). The analysis of liquid chromatography coupled with mass spectrometry suggested the presence of diterpenes and sesquiterpenes in the 70% acetone crude extract. With the results of the analyzes, it was possible to contribute with future phytochemical, pharmacognostic and biological studies of C. floribundus.
Keywords: Prostate Cancer; Quality control; Euphorbiaceae; Pharmacognosy; Phytochemistry.
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