2015 - Letícia Maria Krzyzaniak

Autor/author: Letícia Maria Krzyzaniak

Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas - Universidade Estadual de Maringá

Área do Conhecimento: Farmacognosia

Data de Defesa: 26 de junho de 2015

Orientador: Prof. Dr. João Carlos Palazzo de Mello

Banca examinadora: Prof. Dr. Admilton Gonçalves de Oliveira Junior

                            Prof. Dra. Claudenice Francisca Providelo Sartor

Título: Estudo químico e atividade larvicida das flores de Tagetes patula L.

Resumo: Tagetes patula L. é comumente conhecida como cravo-francês, cravo-de-defunto ou botõesde-solteirão. Na medicina popular suas flores e folhas têm sido utilizadas como antisséptica, diurética, depurativa e repelente de insetos. O objetivo deste trabalho foi realizar o isolamento e a identificação estrutural de substâncias presente na fração semipurificada n-butanol, obtida a partir do extrato das flores de T. patula. Concomitantemente, avaliou-se a atividade larvicida das frações de polaridade crescente frente ao vetor Aedes aegypti. A partir do extrato bruto acetônico das flores de T. patula desengorduradas, obteve-se cinco frações semi-purificadas: hexano (FH), diclorometano (FD), acetato de etila (FAE), n-butanol (FB) e água (FAQ). A fração FB foi fracionada por meio da cromatografia de fase reversa de poliamida (CC), obtendo-se 34 subfrações, das quais foram submetidas à comatografia em contra-corrente de alta velocidade (CCCAV), das quais foram isoladas e identificadas por ressonância magnética nuclear (RMN) 1D (1H e 13C) e CLAE/IES/MS os flavonoides: patuletina e patuletina-7-O-β- glicosídeo (patulitrina). O perfil do extrato bruto, FB e FAE foram determinado por meio da cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Nestas amostras foram identificados os picos referentes às substâncias patuletina e patulitrina mediante a adição dos padrões e do espectro de UV/DAD. A substância majoritária na FAE é a patuletina e na FB é a patulitrina. Neste trabalho também foi desenvolvido um perfil da FB, por meio da eletroforese capilar (EC), adicionando-se padrões de patuletina e patulitrina para a identificação dos picos no eletroferograma, sendo a patulitrina a substância majoritária. A análise por EC apresentou algumas vantagens frente à CLAE, como: tempo de análise, quantidade de solventes utilizado e não utilizar solventes orgânicos. Nos resultados da atividade larvicida a FAE foi a que apresentou maior potencial para continuar os estudos frente Aedes aegypti.

Palavras-chave:  Tagetes patula, métodos cromatográficos, eletroforese capilar, flavonoides, Ressonância Magnética Nuclear, dengue, Aedes aegypti.

Title: Chemical study and larvicidal activity of Tagetes patula L. flowers

Abstract: Tagetes patula L. (Asteraceae) is traditionally known as “cravo-francês”, “cravo-de-defunto” or “botões-de-solteirão”. Ethnomedicine the flowers and leaves have been used as an antiseptic, diuretic, depurative, and insect repellent. The aim of this study was the isolation and structural identification of compounds present in semipurified fraction of n-butanol (BF), obtained from the extract of T. patula flowers. Also, it was evaluated the larvicidal activity of acetone extract degreased (CE) and growing forward polarity fractions to the vector Aedes aegypti. From the CE of flowers of T. patula, were obtained five semi-purified fractions: hexane (HF), dichloromethane (DF), ethyl-acetate (EAF), n-butanol (BF), and water (AQF). The BF fraction was fractionated by reverse phase chromatography polyamide, yielding 34 subfractions. These subfractions were subjected to high-speed counter-current chromatography of which were isolated and identified by nuclear magnetic resonance (NMR) 1D (1H and 13C) the flavonoids: patuletin and patuletin-7-O-β-glucoside (patulitrin). The profile of the CE, BF and EAF were analyzed by high-performance liquid chromatography. The peaks were identified as patuletin and patulitrin adding patterns and the UV spectrum/DAD. The majority compound in the EAF is patuletin and in the BF is patulitrin. This work has also been developed a profile BF by means of capillary electrophoresis, adding patterns patuletin and patulitrin, and it was demonstrated patulitrin as being the majority compound. The capillary electrophoresis analysis showed some advantages to high-performance liquid chromatography, as analysis time, amount of solvents used, and not use organic solvents. The results of larvicidal activity EAF showed the greatest potential to continue forward studies A. aegypti.

Keywords: Tagetes patula, chromatographic methods, capillary electrophoresis, flavonoids, Nuclear Magnetic Resonance, dengue, Aedes aegypti.

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