2003 - Walter Antônio Roman Júnior

MSc. Thesis

Autor/author: Walter Antônio Roman Júnior

Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas- Universidade Estadual de Maringá

Área do Conhecimento: Farmacognosia

Data de Defesa: 23 de janeiro de 2002

Orientador: Prof. Dr.  João Carlos Palazzo de Mello

Banca examinadora:  Prof. Dr. Wagner Vilegas

Prof. Dr. Diógenes Aparício Garcia Cortez

Título: Identificação de nitrocomposto e di-hidroflavonóis, atividade  antibacteriana, antifúngica e antiviral de substâncias isoladas dos extratos liofilizados das raízes de Heteropteris aphrodisiaca O. Mach. MALPIGHIACEAE Nó-de-cachorro.

Resumo: O vegetal Heteropteris aphrodisiaca O. Mach., Malpighiaceae, é conhecido popularmente como “nó-de-cachorro”, um arbusto de 1 a 1,5 m de altura que pode ser encontrado nos cerrados dos estados de Mato Grosso e Goiás. As raízes são irregulares, com rugas e articulações e tem sido amplamente utilizada na medicina popular como afrodisíaco, estimulante, revigorante, antioxidante, hipocolesterolêmico e nas debilidades nervosas. Com as raízes do vegetal, foi produzido extrato, que após a eliminação do solvente orgânico foi concentrado e liofilizado (BST-0298). Esse extrato foi submetido á partição em funil de separação com acetato de etila e após concentração, liofilizado. A fração acetato de etila foi então cromatografada sucessivamente em coluna (Sephadex^® LH-20), fornecendo três di-hidroflavonóis: astilbina [3-O-α-L-ramnosil-trans-(2R,3R)-taxifolina] (l); neoastilbina [3-O-α-L-ramnosil-trans-(2S,3S)-taxifolina] (ll); isoastilbina ou [3-O-α-L-ramnosil-cis-(2R,3S)-taxifolina]-(lll). A partir das raízes preparou-se  também, o extrato BST-0402, que após eliminação do solvente orgânico, foi concentrado e liofilizado. Esse extrato foi cromatografado em coluna (gel de sílica), e por processo de recristalização, foi obtido o nitrocomposto: 2,3,4,6-tetra-O-(3-nitropropanoil)-β-D-glucopiranose (lV) substância inédita. As estruturas das substâncias isoladas (l à IV) foram elucidadas com base na análise dos dados espectrais de IV, EM, RMN 1D (¹H e ¹³C) e 2D (DEPT, COSY, HETLR e HETCOR). Os extratos brutos, bem como as substâncias (l à IV) foram avaliadas frente a atividade antibacteriana, antifúngica e antiviral. O nitrocomposto lV isolado, apresentou CIM em Staphylococcus aureus e Bacillus subtilis nas concentrações de 250 e 125 μg/ml e a CBM resultou em 500 μg/ ml, respectivamente. A atividade antifúngica resultou CIM na concentração de 125 μg/ml frente à Candida albicans, C. parapslosis, C. krusei e C. tropicalis. A CFM contra os mesmos organismos mostrou-se ativa na concentração de 250 μg/ml. O nitrocomposto lV revelou atividade antiviral pelo método TCID₅₀ contra Poliovírus Hep2 na concentração de 50 mg/ml, apresentando 69% de inibição viral. Avaliou-se essa substância, ainda, quanto a atividade antiviral terapêutica pelo método TCID₅₀ nas concentrações de 12,5 e 25 mg/ml, obtendo-se resultado significativo de 94 e 91 % de inibição viral, respectivamente. Na concentração de 50 mg/ml, o resultado observado foi negativo. As amostras de extrato bruto e di-hidroflavonóis não apresentaram resultados significativos nessas análises.

Palavras-chave: Heteropteris aphrodisiaca; Malpighiaceae; nitrocomposto; di-hidroflavonóis; atividade antibacteriana; atividade antifúngica; atividade antiviral.

Title: Nitro-compound identification and dihydro flavonoids, antibacterial, antifungal and antiviral compounds isolated from freeze-dried extracts of Heteropteris aphrodisiaca roots O. Mach., Malpighiaceae, Nó-de-cachorro.

Abstract: The vegetable Heteropteris aphrodisiaca O. Mach., belonging to the family Malphighiaceae popularly is known as "nó-de-cachorro", a bush from 1 to 1,5 m of height that can be found in the savannahs of the states of Mato Grosso and Goiás whose roots are irregular, with wrinkles and articulations and it has been used thoroughly by the popular medicine as aphrodisiac, stimulant, reviver, antioxidant, anticholesterolemic and in the nervous weaknesses. Of the extract BST-0298, it was partitioned with ethyl acetate, and was cromatographed by column was obtained after  crystallization three compounds di-hidroflavonols: astilbin [3-O-α-L-ramnosil-trans-(2R,3R)-taxifolin]; neoastilbin [3-O-α-L-ramnosil-trans-(2S,3S)-taxifolin]; isoastilbin [3-O-α-L-ramnosil-cis-(2R,3S)-taxifolin]. Of the extract BST-0402, after column chromatographic and crystallization, it was isolated a nitrocompound: 2,3,4,6-tetra-O-(3-nitropropanoyl)-β-D-glucopiranosyl. The structures were elucidated with help the data of IR, MS, ¹H NMR, ¹³C NMR, DEPT, COSY, and HETCOR. The isolation of new nitrocompound is significant of the chemotaxonomic point of view. The crude extracts as well as the isolated compounds of Heteropteris aphrodisiaca were tested for antibacterial, for antifungic and antiviral activity. The nitrocompound lV presented a MIC against Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis at the concentrations of 250 and 125 µg/ml and MBC resulted in 500 µg/ml, respectively. The antifungic activity resulted MIC at the concentration of 125 µg/ml against Candida albicans, C. parapslosis, C. krusei and C. tropicalis. MFC against the same organisms was shown at the concentration of 250 µg/ml. The nitrocompound lV revealed antiviral activity for the method TCID₅₀ against Poliovírus Hep2 at the concentration of 50 mg/mL, presenting 69% of inhibition viral. The therapeutic antiviral activity by the method TCID₅₀ at the concentrations of 12.5 and 25 mg/ml, being obtained significant result of 94 and 91% of viral, inhibition respectively. At the concentration of 50 mg/ml, the observed result was negative. The samples of crude extract and di-hidroflavonóis didn't present significant results in those analyses.

Keywords: Heteropteris aphrodisiaca; Malpighiaceae; nitrocoumpound; di-hydroflavonols; antibacterian activity; antifungic activity; antiviral activity.

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